Методы окраски хромосом для цитогенетического исследования

Описание презентации по отдельным слайдам:

• 

  1 слайд

  Выполнил:
  Коркунов Роман Юрьевич
  Учитель биологии и географии
  “МАОУ Гимназии №49 г. Тюмени”

  Методы окраски хромосом

• 

  2 слайд

  В зависимости от целей цитогенетического исследования используются различные методы окрашивания хромосом. Наиболее распространенными из них являются
  рутинная или обычная окраска
  и ряд методов дифференциального окрашивания хромосом:
  Q-окраска,
  G-окраска,
  С-окраска,
  R-окраска
  NOR- или Ag-окраска.

  Методы окрашивания
  2

• 

  3 слайд

  делятся на две группы:
  1) приводящие к образованию сегментов вдоль длины всех хромосом (например Q-, G- или R-сегменты);
  2) приводящие к окрашиванию специфических хромосомных структур, в результате чего выявляется ограниченное число сегментов (С-, Т- или NOR-сегменты).

  Методы дифференциального окрашивания
  3
  Фотография метафазной хромосомы человека N 13

• 

  4 слайд

  Достигается путем простого окрашивания полученных хромосомных препаратов красителем Романовского-Гимза (азур-эозином), без какой-либо предварительной обработки. Это приводит к равномерной окраски хромосом по длине, что дает возможность идентифицировать хромосомы и оценить их количество в препарате.
  Рутинная окраска хромосом
  4

• 

  5 слайд

  Впервые метод был предложен Касперссоном, который показал, что при обработке хромосом с помощью флуорохрома акрихиниприта во флуоресцентном микроскопе видны поперечные светящиеся полосы (бэнды), расположение которых характерно для каждой хромосомы – это Q-окраска.
  Q-окраска является индикатором хроматина с повышенным содержанием AT-пар оснований, поскольку они интенсивнее флюоресцирует в соответствующих участках хромосомы.

  Дифференциальная окраска хромосом
  5

• 

  6 слайд

  Методики, с помощью которых получают G-окраску хромосом, разнообразны. Общим для всех них является:
  • определенная предварительная обработка препаратов хромосом перед окрашиванием (трипсином).
  •использование для окрашивания нефлюоресцирующих основных красителей (азуры, метиленовый синий);
  На G-окрашенных хромосомах наблюдаются изменения рисунка линейной дифференцированности хромосом, связанные со степенью митотической конденсации хромосомы.

  6
  G-окраска

• 

  7 слайд

  при R-окраске противоположен рисунку при G–окраске.
  Ключевым моментом выполнения R-окраски является нагревание препаратов хромосом при высокой температуре (78-90С)
  Темноокрашенными здесь являются эухроматиновые участки хромосом, а светлыми — гетерохроматиновые.
  Существует несколько модификаций метода R-окраски и каждый из них имеет свою кодировку по международной цитогенетической номенклатуре. Одним из них является обработка препаратов Ва(ОН)2 с контролируемой тепловой денатурацией и последующей отмывкой в дистиллированной воде и окрашиванием раствором красителя Гимза. Кодировка R-окраски, полученной таким способом — RHG.
  7
  R-окраска

• 

  8 слайд

  Метод основан на кратковременном воздействии на препараты хромосом щелочью. В отличие от предыдущих трех типов дифференциальной окраски при С-окраске в каждой хромосоме человека краситель воспринимает лишь центромерный и околоцентромерный районы во всех хромосомах и длинное плечо Y-хромосомы.
  Используется для уточнения характера хромосомных перестроек, особенно помогая в идентификации перицентромерных инверсий.
  8
  С-окраска.
  Кариотипы P. sativumL.: C- (а) и OR- (б) дифференциальное окрашивание хромосом.
  С- окрашенные хромосомы M. chamomilla сорта Сибирская бизаболольная.

• 

  9 слайд

  Избирательная окраска – окраска отдельных районов индивидуальных хромосом.
  NOR-окраска — окрашивание хромосом аммонийным серебром, при этом окрашивается ядрышковый организатор (вторичная перетяжка)
  FISH-окраска — связана с использованием ДНК проб, меченных различными флюорофорами, специфичными для различных хромосом
  Т-окраска — вариант R-окраски с преимущественным окрашиванием теломерных районов хромосом в коротких и длинных плечах.
  GISH-метод-и позволяет различать более близкородственные геномы, возможным уточнить структуру перестроенных хромосом и определить точки разрывов на хромосомных плечах.

  9
  Избирательную окраска хромосом
  A-, B-, и D- геномы гексаплоидной пшеницы, дифференцированные с помощью GISH.

• 

  10 слайд

  Позволяет выявить не всякий ЯО, а лишь функционирующий в предшествующей митозу интерфазе, а интенсивность их окрашивания соответствует интенсивности функционирования.
  10
  NOR-окраска
  Ag-NOR окраска метафазных хромосом восточно-азиатской полевой мыши.

• 

  11 слайд

  M-FISH (Multitarget, Multifluor, Multicolor или Multiplex FISH) является общим названием традиционных многоцветных FISH-методов. Принцип M-FISH заключается в раздельной цифровой регистрации сигнала всех используемых флуорофоров при последовательной смене комплектов фильтров.

  11
  FISH-окраска
  Многоцветный бэндинг пятой хромосомы человека

• 

  12 слайд

  Анализ кариотипа человека. Цитогенетический метод анализа хромосом человека. [Электронный доступ] http://medicalplanet.su/genetica/159.html
  Вариации FISH-метода. [Электронный доступ] http://olgabut08.narod.ru/varfish.htm
  FISH — окрашивание хромосом. [Электронный доступ] http://studbooks.net/1310299/meditsina/fish_okrashivanie_hromosom
  Хромосомная организация геномов растений с хромосомами малых размеров или малоинформативным рисунком дифференциального окрашивания. [Электронный доступ] http://textarchive.ru/c-2344154-pall.html

  12
  Список литературы

Автор статьи

Анастасия

Задать вопрос

Эксперт